EZTrans細胞轉染試劑作為新一代的轉染試劑,其轉染原理是帶正電的陽離子聚合物與核酸中帶負電的磷酸基團形成帶正電的復合物后與細胞表面帶負電的蛋白多糖相互作用,并通過胞吞作用進入細胞。本產品經過李記生物的優化處理,具有轉染效率高,細胞毒性低,操作簡單,重復性好,適用范圍廣等特點。...
細胞轉染是將外源性基因導入細胞內的一種專門技術。隨著基因與蛋白功能研究的深入,轉染目前已成為實驗室工作中經常涉及的基本方法。常規轉染技術可分為兩大類,一類是瞬時轉染,一類是穩定轉染。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,因此一個宿主細胞中可存在多個拷貝數,產生高水平的表達,但通常只持續幾天,多用于啟動子和其它調控元件的分析。一般來說,超螺旋質粒DNA轉染效率較高,在轉染后24-72小時內(依賴于各種不同的構建)分析結果,常常用到一些報告系統如熒光蛋白,β半乳糖苷酶等來幫...
一、什么是細胞增殖細胞增殖是生物體的重要生命特征,細胞以分裂的方式進行增殖。單細胞生物,以細胞分裂的方式產生新的個體。多細胞生物,以細胞分裂的方式產生新的細胞,用來補充體內衰老或死亡的細胞。二、細胞增殖的意義和方式意義:細胞增殖是生活細胞的重要生理功能之一,是生物體的重要生命特征。細胞的增殖是生物體生長、發育、繁殖以及遺傳的基礎。方式:真核生物的分裂依據過程不同有三種方式,有有絲分裂,無絲分裂,減數分裂。其中有絲分裂是人、動物、植物、真菌等一切真核生物中的一種zui為普遍的分...
在Western實驗中,蛋白Marker可以監控蛋白質在SDS-PAGE中的遷移,監控蛋白的轉膜效率,確定蛋白分子量大小。選擇正確的蛋白Marker是westernblot實驗成功的條件之一。蛋白Marker分為兩種:一種是未預染的Marker,即寬分子量蛋白標準,高分子量蛋白標準及低分子量蛋白標準;另一種是預染的Marker,即單色預染和多色預染。一、未預染蛋白Marker未預染的蛋白Marker是簡單,也是最準確的一種,由于沒有附帶染料分子或者標記大小正好是蛋白原本的大小...
在細胞培養過程中,經常加入5%-20%的Gibco胎牛血清,最常使用的Gibco胎牛血清濃度是10%。高濃度的血清可能改變細胞的基因表達譜,影響后續實驗的結果,我們在實驗中使用10%的Gibco澳洲胎牛血清培養293T細胞,效果非常好。但是有些細胞也會使用5%的Gibco胎牛血清或者20%的Gibco胎牛血清,要根據具體細胞選擇合適的Gibco胎牛血清濃度。為防止客戶由于操作方面而使黑點生成的辦法。對此一定要做好以下幾點。方可使細胞培養順利。(1)盡可能地減少血清凍融次數。(...
沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,不會影響產品性質。要除去沉淀,離心血清(400g,1-2分鐘)或者簡單的讓其沉淀在瓶子底部,將血清小心的轉移到另一個無菌瓶里(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀,因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解。所以,使用產品時要搖動并加熱血清至37℃,沉淀會自然消失。如何避免胎牛血清中產生沉淀?按如下操作可避免沉淀的產生:(1)解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生。(2)血清分裝凍...
細胞凋亡是細胞的基本特征之一,它在機體的胚胎發育、組織修復、內環境的穩定等方面起著十分重要的作用。形態學檢測是研究細胞凋亡的基本方法。細胞凋亡的形態學變化是多階段的,起初,細胞間連接和微絨毛消失,細胞體積縮小,胞漿凝縮,內質網變疏松并與胞膜融合,形成一個個空泡,核糖體與線粒體等細胞器聚集,結構尚無明顯改變,細胞核內的染色質逐漸凝聚成新月狀附在核膜周邊,細胞核固縮呈均一的致密物,進而斷裂成碎塊,此時細胞膜仍保持完整:然后,胞膜及核膜不斷出芽、脫落,一個細胞變成數個大小不等的有膜...
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